菌株名：Escherichia coli MG1655::lacIq-mCherry-Kmᴿ

1200 元

用途：pKJK5::GFP 水平基因转移实验专属供体菌

核心基因型

• 背景菌株：野生型大肠杆菌 MG1655，遗传背景清晰、接合活性稳定

• 染色体定点整合元件：

1. lacIq：强效阻遏蛋白，沉默质粒 GFP 表达

2. mCherry：红色荧光标记，示踪供体菌本体

3. Kmᴿ：卡那霉素抗性筛选标记

表型特征

• 荧光：仅发红光，无绿色荧光（GFP 被抑制）

• 抗性：卡那霉素抗性

• 携带质粒：配套搭载 pKJK5::GFP

• 接合特性：具备完整接合能力，可高效转移质粒

工作调控逻辑

1. 供体自身：lacIq持续表达，结合质粒启动子，GFP 完全关闭

2. 质粒转入无lacIq的受体菌：抑制解除，GFP 启动发绿光

3. 荧光双色区分：红光 = 原始供体，绿光 = 质粒成功转移的接合子

常规培养筛选

• 培养温度：37℃

• 筛选平板：添加卡那霉素 LB 平板

• 观测方式：荧光显微镜、流式细胞仪识别红光菌群